Forskning i bakterier kræver omhyggeligt arbejde med talrige udstyr og instrumenter. For at mikroorganismer kan formere sig hurtigst muligt under laboratorieforhold og for at kunne opretholde normal vital aktivitet, anvendes specielle næringsmedier. Deres sammensætning og biofysiske forhold er velegnede til aktiv vækst af en bakteriekultur.
Næringsmedier. Mikrobiologi og andre applikationer
Bakteriekolonier dyrkes i laboratoriet på petriskåle fyldt med gelélignende eller halvflydende indhold. Disse er næringsmedier, hvis sammensætning og egenskaber er så tæt som muligt på de naturlige for afgrødevækst af høj kvalitet.
Sådanne miljøer bruges i mikrobiologisk forskning og i medicinske diagnostiske laboratorier. Sidstnævnte arbejder oftest med udstrygninger af patogene eller opportunistiske bakterier, hvis systematiske placering bestemmes direkte i institutionen.
Naturlig og syntetiskonsdag
Den grundlæggende regel for at arbejde med bakterier er den korrekte udvælgelse af næringsmediet. Det skal opfylde adskillige kriterier, herunder indholdet af mikro- og makroelementer, enzymer, en konstant surhedsværdi, osmotisk tryk og endda procentdelen af ilt i luften.
Nærende medier er klassificeret i to store grupper:
- Naturlige miljøer. Sådanne blandinger fremstilles af naturlige ingredienser. Det kan være flodvand, plantedele, gødning, grøntsager, plante- og dyrevæv, gær osv. Sådanne miljøer er karakteriseret ved et højt indhold af naturlige kemikalier, hvis variation fremmer væksten af bakteriekultur. På trods af disse åbenlyse fordele tillader naturlige miljøer ikke specialiseret forskning med specifikke bakteriestammer.
- Syntetiske medier. De adskiller sig ved, at deres kemiske sammensætning er kendt i nøjagtige forhold mellem alle bestanddele. Sådanne medier er forberedt til en specifik kultur af bakterier, hvis metabolisme er kendt på forhånd af forskeren. Faktisk er det af denne grund muligt at forberede et sådant syntetisk miljø til udvikling af mikroorganismer. De bruges til at analysere bakteriers vitale aktivitet. Du kan for eksempel finde ud af, hvilke stoffer de udleder til miljøet og hvor meget. Mikroorganismer vil også vokse i naturlige medier, men det er umuligt at spore nogen kvantitative ændringer i sammensætningen på grund af uvidenhed om de oprindelige proportioner af stoffer.
Differential-diagnostiske miljøer
I arbejdet med bakterier kan ikke kun almindelige næringsmedier bruges. Mikrobiologi er en enorm videnskab, og derfor er det af en eller anden grund nødvendigt at foretage et udvalg af mikroorganismer, når man udfører en undersøgelse. Brugen af differentialdiagnostiske medier i laboratoriet gør det muligt at udvælge de ønskede bakteriekolonier på en petriskål i henhold til det biokemiske tegn på deres vitale aktivitet.
Sammensætningen af sådanne miljøer inkluderer altid følgende komponenter:
1. Næringsstoffer til cellevækst.
2. Analyseret substrat (stof).
3. En indikator, der vil give en karakteristisk farve, når en bestemt reaktion opstår.
Et eksempel er det differentialdiagnostiske næringsstof "Endo". Det bruges til at udvælge kolonier af bakterier, der kan nedbryde laktose. Til at begynde med har dette medium en lyserød farve. Hvis en koloni af mikroorganismer ikke er i stand til at nedbryde laktose, får den den sædvanlige hvide farve. Hvis bakterierne kan nedbryde dette substrat, bliver de til en karakteristisk klar rød farve.
valgfri onsdage
Diagnostiske laboratorier arbejder ofte med vatpinde, der indeholder mange forskellige typer bakterier. For kvalitetsarbejde er det naturligvis nødvendigt at vælge de kolonier, vi har brug for, blandt snesevis af udenforstående. Det er her et bakterievækstmedium kan hjælpe, som er ideelt formuleret til kun at understøtte én type mikroorganisme.
F.eks.et sådant elektivt miljø er kun egnet til reproduktion af Escherichia coli. Så efter at have sået mange bakterier på en petriskål, vil vi kun se kolonier af den samme Escherichia coli og ikke flere. Før arbejdet påbegyndes, er det nødvendigt at kende metabolismen af den undersøgte bakterie godt for at kunne vælge den fra en blanding af andre arter.
Fast, halvfast og flydende dyrkningsmedie
Bakterier kan ikke kun dyrkes på faste underlag. Næringsmedier adskiller sig fra hinanden i deres aggregeringstilstand, hvilket afhænger af sammensætningen under fremstillingen. I starten har de alle en flydende konsistens, og når gelatine eller agar tilsættes i en vis procentdel, størkner blandingen.
Flydende dyrkningsmedier findes norm alt i reagensglas. Hvis det bliver nødvendigt at dyrke bakterier under sådanne forhold, tilsæt en opløsning med en dyrkningsprøve og vent 2-3 dage. Resultatet kan variere: der dannes et bundfald, der kommer en film, små flager flyder, eller der dannes en uklar opløsning.
Tæt dyrkningsmedium bruges ofte i mikrobiologisk forskning til at studere egenskaberne af bakteriekolonier. Sådanne medier er altid gennemsigtige eller gennemskinnelige, så det er muligt korrekt at bestemme farven og formen på kulturen af mikroorganismer.
Medieforberedelse
Substrater såsom kød-peptonblandinger baseret på bouillon, gelatine eller agar er meget nemme at tilberede. Hvis du skal lave et fast eller halvflydende substrat, til en væsketilsæt henholdsvis 2-3% eller 0, 2-0, 3% gelatine eller agar. De spiller en stor rolle i hærdningen af blandingen, men de er ikke en kilde til næringsstoffer. Således opnås næringsmedier, der er egnede til vækst af en bakteriekultur.
