Moderne medicin har specifikke diagnostiske metoder, der gør det muligt at fastslå ætiologien af sygdomme hos mennesker baseret på definitionen af patogenet, genetisk fremmede stoffer, der stimulerer immunresponset, nukleinsyrer samt allergiske og immunforandringer der opstår på grund af hans handlinger. I dag er RIA meget udbredt i immunologi og virologi, det vil sige radioimmunoassay, målene for indstilling, komponenter, kurset, som vi vil overveje i denne artikel. Denne analyse er i stand til at påvise antigener som et resultat af deres interaktion med antistoffer.
Definition
RIA er en metode til diagnosticering af biologisk aktive stoffer i væsker, som er baseret på antigeners reaktion med antistoffer ved anvendelse af radionuklid-mærkede analoge stoffer, der har særlige bindingssystemer. Efter deres interaktiondannes et immunkompleks, som adskilles og dets radioaktivitet studeres. Det er kendt, at radioimmunoassay udføres ved brug af standardreagenssæt.
Hvert reagens er i stand til at bestemme koncentrationen af et specifikt stof. Den biologiske væske taget fra en person blandes med et reagens, efter inkubationsperioden separeres de frie og bundne radioaktive stoffer, derefter udføres radiometri og resultaterne beregnes. En isotop af jod bruges til at mærke stoffer. Det er markeret og tilføjet i en vis mængde.
Application
Radioimmunanalyse har en bred anvendelse inden for medicin og mikrobiologi. Det bruges til at diagnosticere hjerte- og karsygdomme, sygdomme i det endokrine og andre kropssystemer. RIA'er bruges også ofte til at identificere årsagen til infertilitet, patologien af fosterudvikling. I onkologi udføres denne analyse for at bestemme markørerne for neoplasmer for at kunne overvåge effektiviteten af behandlingen. I immunologi bruges RIA til at studere tilstedeværelsen af immunglobuliner, enzymer, proteiner og så videre i blodet. I dag giver denne analyse dig mulighed for at detektere koncentrationen af forskellige hormoner op til en milliontedel af et gram. Radioimmun blodanalyse er således meget brugt i kardiologi, onkologi, endokrinologi, gynækologi og virologi.
RIA-metoder
Det er sædvanligt at skelne mellem flere analysemetoder, afhængigt af artenreaktioner:
- Den ikke-konkurrerende metode er karakteriseret ved sådanne reaktionskomponenter som standard og påviselige antigener, bufferopløsning, isotopmærkede antistoffer, visse antistoffer, der binder til sorbenten. Et antigen tilsættes til de antistoffer, der skal testes. Efter inkubation opstår antigen-antistof komplekser, sorbenten vaskes, mærkede antistoffer tilsættes, som binder til antigenet i komplekset. Radioaktiviteten afhænger af koncentrationen af det antigen, der testes.
- Kompetitiv radioimmunoassay er drevet af antigenkonkurrence. Her er der sådanne komponenter i reaktionen som kontrol- og bestemte antigener, en bufferopløsning, visse antistoffer, der binder til sorbenten, samt et isotopmærket antigen. Diagnosen begynder med introduktionen af det antigen, der undersøges. Et antigen-antistofkompleks dannes på sorbenten. Derefter vaskes sorbenten, og det mærkede antigen injiceres. Derved binder den sig til antistoffet. Ved hjælp af tællere måles reaktionen og mængden af radioaktivitet. Det vil være i omvendt forhold til mængden af antigen i prøven.
- Den indirekte metode er den mest almindelige. I dette tilfælde har radioimmunoassayet af reaktionskomponenten såsom kontrol- og testserum, antigener eller antistoffer, der er bundet på sorbenten, antistoffer mærket med isotoper, bufferopløsninger. Antistoffer eller antigener, der er diagnosticeret, reagerer med antigener eller antistoffer, der er bundet til sorbenten. Derefter fjernes inkubatet, mærkede antistoffer injiceres, som binder tilantigen-antistofkomplekser.
Analysemetode
Så radioimmunoassay udføres ved hjælp af specielle reagenser. Sættene er standard, så eventuelle fejl eller overtrædelser er ikke tilladt. Diagnostiske resultater er pålidelige. Analysen udføres om morgenen, for dette tager de venøst blod fra en person. I laboratoriet separeres serum fra blodet, som skal bruges til RIA. Dette serum er blandet med reagenser. Den resulterende blanding inkuberes ved en given temperatur i en termostat.
Fri og bundne isotoper adskilles i den resulterende blanding. Derefter gennemgås det modtagne materiale, og resultaterne beregnes. Radioimmunoassay-mekanismen har flere muligheder. Den ovenfor beskrevne teknik er en væskefase RIA, da alle komponenter er i flydende tilstand. Der er RIA og fast-fase, hvor antistoffer placeres i en bærer, der ikke opløses i væske.
Diagnostiks tilgængelighed
Brugen af denne diagnostiske metode i medicin bliver mere og mere populær hvert år. For nylig er radioimmunoassay blevet en standard diagnostisk metode, der kan ordineres af en læge, når en endelig diagnose stilles. I lang tid blev denne type analyse kun udført i laboratorier, i dag er det blevet en almindelig forskningsmetode. Men RIA kræver brug af dyrt udstyr (gammatællere), og reagenssæt har en kort levetid. Alt dette er den største ulempe ved en sådan analyse, som bestemmer densdyre omkostninger.
Desuden er RIA for nylig begyndt at erstatte mere moderne forskningsmetoder, der ikke kræver interaktion med isotoper. Disse omfatter enzymimmunoassay. RIA er således ønskelig i mange klinikker. Den har længe været brugt i store byer og diagnostiske centre, men på almindelige hospitaler i små byer bruges denne analyse praktisk t alt ikke på grund af dens høje omkostninger.
Dignity of RIA
Radioimmunoassay har mange fordele. Det er ret specifikt og har høj følsomhed, hvilket gør det muligt at bestemme tilstedeværelsen af biologisk aktive stoffer i utrolig små mængder. Denne analyse udføres meget enkelt, en person er kun forpligtet til at donere venøst blod. Testresultaterne er 100 % nøjagtige og klar allerede næste dag. RIA kan også nemt automatiseres. Således giver denne analyse dig mulighed for at identificere proteiner, der er affaldsprodukter fra infektiøse bakterier, hvilket indikerer tilstedeværelsen af infektion i kroppen.
Diagnose in Virology
Den mest lovende RIA er for virologi, fordi den giver dig mulighed for hurtigt at identificere virale patogener. Det skyldes, at forekomsten af forskellige infektioner i de senere år har været stigende, som breder sig med høj hastighed og forårsager dødelighed blandt mennesker. Dette gælder især for lande, der ikke har en højsocial og økonomisk udvikling (landene i Fjernøsten), er radioimmunoassay simpelthen uundværligt her. Mikrobiologi bruger også denne diagnostiske metode til at opdage infektionssygdomme forårsaget af patogene bakterier. For eksempel er RIA meget brugt til at påvise tyfus. I de første dage af sygdommen, før udnævnelsen af behandling, er det nødvendigt at gennemføre en undersøgelse af afføring og opkast. De diagnostiske resultater vil dog blive opnået efter lang tid. Her kommer RIA til undsætning, analysen giver dig mulighed for at identificere årsagen til sygdommen på kort tid. En person donerer blod, næste dag er resultaterne af undersøgelsen klar. Denne analyse hjælper med at stille en nøjagtig diagnose.
Resultater
Radioimmunoassay er i øjeblikket en af de mest følsomme diagnostiske metoder. Det bruges til at analysere ethvert stof, mod hvilket der kan opnås antistoffer. Denne metode gør det muligt at lave mange prøver i det mindste volumen af den undersøgte væske, samt at registrere resultaterne på kortest mulig tid, da det kan være fuldautomatisk. Denne analyse blev udviklet i 1950'erne af Solomon Burson. Tredive år senere blev det udbredt. Til dato er der ikke et hundrede procent alternativ til RIA, da analysen har en høj følsomhed. RIA bruges i forskellige grene af medicin, såvel som i mikrobiologi og virologi.
Endelig
Brugen af metoden i virologi er meget relevant i dag, da den giverevnen til at undersøge spredningen af infektioner, stille en præcis diagnose og ordinere specifik behandling. Dette problem er især relevant for lande, der har et lavt niveau af økonomi og social udvikling. Denne analyse giver dig også mulighed for at opdage mængden af hormoner og enzymer i den menneskelige krop. For at opnå pålidelige resultater behøver forskeren kun at donere blod til analyse. Medicin står ikke stille, sammen med radioimmunoassay dukker nye forskningsmetoder op, men RIA fortsætter med at være en af førende inden for medicinsk diagnostik.
