Denne artikel vil blive viet til fænomenet nedbørsreaktion. Her vil vi overveje træk ved formuleringen af dette fænomen, fænomenet diffusion, generelle karakteristika, rolle i menneskelivet og meget mere.
Introduktion til fænomenet
Nedfældning er et fænomen af en serologisk type, hvor opløselige antigener interagerer med antistoffer, og som følge heraf observeres udfældning - et bundfald.
Det generelle kendetegn ved udfældningsreaktionen er en form for koordineret påvirkning af antigen og antistof. Disse typer af interaktioner gør det muligt at bestemme tilstedeværelsen af ukendte antigener i teststoffet ved at tilføje kendte antistoffer og antigener. Udfældningsprocessen uden tilstedeværelse af s alte vil forløbe værre, og det bedste optimum ligger inden for området 7,0-7,4 pH.
Bestanddele af en reaktion
Der er tre hovedelementer blandt komponenterne i udfældningsreaktionen:
- Et antigen med en molekylær natur. Den er i den fine type tilstand, med andre ord, denopløselig. Også et sådant antigen kaldes et præcipitogen, som er et lysat eller vævsekstrakt osv. Et præcipitogen har en karakteristisk forskel fra et agglutinogen, som ligger i størrelsen af de partikler, det består af. Agglutinogen har en iboende cellestørrelse, og præcipitogener står i forhold til størrelsen af molekylet. Antigenopløsningen er karakteriseret ved gennemsigtighed.
- Et antistof fundet i humant blodserum såvel som i immundiagnostisk serum, som indeholder de undersøgte antistoffer.
- Elektrolytter er natriumchloridopløsninger, der er isotoniske.
Bundfaldsproduktion
Opsætning af en udfældningsreaktion er umulig uden et bundfald, som opnås ved at male materialer og udvinde proteinantigener fra dem. Ekstraktion sker ved kogning eller andre metoder.
Lysater, såvel som vævs- og organekstrakter, blodserum, forskellige typer filtrater baseret på mikrobielle bouillonkulturer, samt s altekstrakt af mikroorganismer og autolysatstoffer, er iøjnefaldende eksempel på præcipitogener.
Opsætning i nedbør
Lad os nu overveje metoden til opsætning af udfældningsreaktionen.
Der udføres en ringfældningsreaktion, som foregår i specielt forberedte reagensglas. Serum indføres i skålens hulrum ved at hælde det over væggen ved hjælp af en pipettetud. Derefter lægges den passende mængde bundfald forsigtigt ovenpå, og derefter bringes røret til en lodret position fra en vandret. Opsætning og hensyntagen til udfældningsreaktionen er en meget omhyggelig operation. Resultatet registreres efter fremkomsten af en hvid ring på grænsen mellem antigenet og antistoffet. Hvis de reagerende elementer i reaktionen svarer til hinanden, så binder de, men det bliver mærkbart efter lang tids interaktion
Fældningsreaktionen udføres også i en petriskål eller på et glas dias, hvor agar gel overføres, påføre det i et lille lag. Efter at det hærder i gelen, skæres et lille antal brønde ud, hvori antigener og antistoffer vil blive placeret. Der er to måder at udføre denne handling på: metoden til radial immundiffusion og dobbelt immundiffusion.
Generelle oplysninger
Mekanikken i arbejdet med nedbør ligner agglutinationsanordningen. Under påvirkning af serum af immuntype reducerer antigenet, som allerede er gået ind i reaktionen, dets spredningsgrad. En vigtig betingelse er gennemsigtigheden af både serum og antigen.
Du kan forbedre registreringen af reaktionen, hvis du overlejrer antigener på antistoffer. Som et resultat kan udseendet af bundfald i form af en ring observeres. Dette fænomen kaldes ringudfældning og udføres i specielle rør med en diameter på 2,5 til 3,5 mm. Et af de mest almindelige eksempler på en udfældningsreaktion er diagnosen miltbrand.
Nedfældning gør det muligt at bestemme niveauet af toksicitet af en difterikultur i agar.
Under den overvejede reaktionudfældning af antigene komplekser og antistoffer forekommer. Udfældning er et immunologisk fænomen, der giver dig mulighed for at bestemme mængden af antistoffer i blodserumet hos en syg eller vaccineret person og dyr.
Titreringskonsekvens
Det er vigtigt at vide, at data opnået ved titrering af ovenstående metode ikke er kvantificerbare. For at skabe og analysere en kvantitativ vurdering af det indeholdte antal antistoffer blev der udviklet en speciel reaktionsteknik af M. Heidelberger og E. Kabat, som er baseret på søgning og identifikation af ækvivalenszonen. Blanding af aldersantallet af antigener med et konstant volumen af antiserum fører til en stigning i det oprindeligt dannede præcipitat, og derefter falder det igen på grund af en stigning i evnen til at opløse antigenkomplekserne. Ved at bestemme mængden af antistoffer i supernatanterne indeholdt i hvert rør, kan du konstatere, at et vist antal skåle med antistoffer vil mangle væske. Her vil der i sammenligning med andre reagensglas dannes det største bundfald. På grund af dette og subtraktion af det antigene proteinpræcipitat fra den samlede værdi af proteiner er det muligt at opnå den nøjagtige værdi af antistofferne indeholdt i volumenet af det specifikke serum, der undersøges. Yderligere bestemmes mængden af proteinmolekyler i bundfaldet af mængden af nitrogen eller ved hjælp af kolorimetriske metoder.
Evaluering af værdier
Estimering af udfældningsværdier i diagnostisk metodologi bør tage højde for muligheden for tilstedeværelsen i immunserumet af et antistof, som ikke har præcipitins egenskab, hvoraf det følger, at selve bundfaldet muligvis ikke er dannet efter at have reageret med antigener. Listen over sådanne molekyler inkluderer ufuldstændige antistoffer og nogle arter fra gruppen af gamma-A-globuliner.
Fældningsreaktionen under laboratorieforhold finder sin anvendelse i forskellige typer modifikationer. For eksempel bruges termofældningsreaktionen til at påvise bakterielle antigener af botulisme, miltbrand osv., som ikke gennemgår termisk denaturering. I modsætning til ringfældning bruger denne type reaktion filtrater af det pågældende materiale i kogt tilstand.
Analyse af udfældningsreaktionen i en kompleks blanding gør det ikke muligt at karakterisere egenskaberne af individuelle elementer i blandingen. I sådanne tilfælde tyr en person til metoden med udfældning i agar og bruger også immunelektroferese.
Diffus nedbør
I dette forskningsområde er der konceptet om en diffus udfældningsreaktion (RPD). Det er baseret på evnen til at diffundere i gelen af antistoffer og opløselige antigener. Diffusion er evnen af et molekyle af et bestemt stof til at trænge ind i et andets molekyler, hvilket er forårsaget af termisk bevægelse.
Gel er et dispergeret type system, hvori den flydende fase er fordelt jævnt i den faste fase. Oftest bruges agargel til sådan en reaktion.
Efter at have angivet parametrene, indforhold, hvorunder molekylerne kan diffundere i forhold til hinanden, vil deres møde være ledsaget af dannelsen af et antigen + antistof kompleks. En sådan neoplasma er i stand til at diffundere, idet den er i selve gelen, og den vil udfældes i form af en strimmel, der kan detekteres med det blotte øje. Hvis antigenet og antistoffet er homologe, dannes der ikke noget bånd.
Oprettelse af de betingelser, hvorunder diffusion vil finde sted i agarlaget, involverer udhældning af komponenterne, men det samlede antal brønde og deres relative position bestemmes af hvilken type opgave der kræves bestemme. RPD giver en person mulighed for at detektere og identificere ukendte isolerede vira ved at teste med kendte antistofsera.
Application
Nedbør er meget udbredt, ikke kun til diagnosticering af sygdomme, men finder også anvendelse i retsmedicinske undersøgelser. Det er svært at forestille sig en analyse, hvor det er muligt at bestemme arten af blod, en del af et organ eller væv, der findes på et gerningsvåben, som ikke bruger udfældningsreaktionen. Under denne proces anvendes udfældende sera, som opnås ved at immunisere forskellige dyr og fugle. Det er vigtigt, at serumtiterniveauet ikke er mindre end 1:10000, og det skal også have tilstrækkelig specificitet. Fra den opdagede plet af blod eller dets skorpe laves et ekstrakt til fysisk. løsning, som vil blive yderligere udsat forudfældende serum. Ifølge denne reaktion er det muligt at fastslå typerne af vævs- og organproteiner hos både mennesker og dyr. At opnå uklare ekstrakter tvinger en til at ty til nedbør på agar.
Konklusioner
Ved at analysere den læste information kan vi konkludere, at udfældningsreaktioner er ekstremt vigtige for en person, da de tillader diagnosticering af forskellige antigener ved hjælp af antistoffer. Dette fænomen er også meget udbredt i retsmedicinske undersøgelser og giver dig mulighed for at identificere typen af blod, væv eller organ i forhold til et bestemt emne. Der er flere typer og metoder til nedbør, som bruges i overensstemmelse med de nye behov for det problem, der skal løses.
