De mange forskellige bakterielle infektioner kræver en klar identifikation af patogenet og definitionen af dets art. For at bestemme typen af mikroorganisme bliver mikrobiologer hjulpet af dens tinktorielle egenskaber - mikrobens modtagelighed for farvning med forskellige farvestoffer. Denne metode giver dig mulighed for at udforske patogenets morfologi. Bakteriers tinktorielle egenskaber er af stor betydning for praktisk og teoretisk forskning inden for mikrobiologi.
Mikrobiel forskning
I bakteriologi er der mange metoder til farvning af mikroorganismer. Alle er baseret på bakteriers farveegenskaber. Farvning giver dig mulighed for at bestemme deres form, struktur, størrelse, relative position. Dette gør det muligt at løse problemerne med at systematisere typerne af mikroorganismer i generel biologi og sammenlignende mikrobiologi.
Hvorfor male dem
Bakterier er praktisk t altgennemsigtige organismer, og uden brug af farvning er de dårligt synlige til konventionel mikroskopi. Man kan bruge specielle typer mikroskopi (fasekontrast, mørkt felt) til at studere objekter, men den nemmeste måde er at farve, hvorefter bakterierne bliver synlige i et konventionelt lysmikroskop.
Prøveforberedelse
Uanset hvilken farvningsteknik der anvendes, er der ensartede regler for klargøring af det undersøgte objekt. Følgende trin er obligatoriske:
- Sterile instrumenter laver en udstrygning på et objektglas.
- Prøven er ved at blive tørret. Dette gøres ved stuetemperatur eller ved hjælp af tørreskabe.
- Efterfulgt af fikseringsstadiet - mikroorganismer fæstnes til glasset med specielle forbindelser.
- Korrekt farvning - prøven dækkes med farvestof i et bestemt tidsrum, hvorefter den vaskes af.
- Afsluttende tørring - prøven tørres igen.
De mest almindelige farvestoffer
De mest almindeligt anvendte farvestoffer er baseret på anilin med forskellige syreværdier (pH). De fleste farvestoffer er pulvere, der er fortyndet i alkohol.
Farvestoffer, hvori kationer er farvestofferne, kaldes basiske (pH større end 7). De kan bruges til at farve mikroorganismer i rød (magenta, safranin), violet (methylviolet, thionin), blå (methylenblå), grøn (malakitgrøn), brun (chrysoidin) og sort (indulin) farver.
Farvestoffer, hvor farvestofferne er anioner, kaldes sure (pH mindre end 7). De vil farve prøven rød (eosin), gul (picrin) eller sort (nigrosin).
Der er en gruppe neutrale farvestoffer (f.eks. rhodamin B), hvor både kationer og anioner fungerer som farvestoffer.
Kultur død eller levende
Farvningsmetoder er opdelt i to grupper i henhold til testprøvens livsform.
- Vital (livstid) farvning. Denne metode til at studere mikroorganismers egenskaber bruges i studiet af levende væv, hvilket gør det muligt at observere mikrobers vitale processer. Til denne farvning anvendes farvestoffer med lav toksicitet og høj gennemtrængningsevne.
- Post-vital farvning. Dette er farvning af døde eller dræbte mikroorganismer. Takket være bakteriernes tinktorielle egenskaber bestemmer mikrobiologer deres struktur. Det er denne farvning, der er mest udbredt.
Gram-positive og Gram-negative
Det er disse bakteriers egenskaber, der kan findes i instruktionerne til forskellige lægemidler. Denne metode til at studere bakteriers farveegenskaber er baseret på brugen af ensian violet farvestof og jodfiksering. Dette er teknikken af Hans Christian Gram, en dansk læge, der foreslog det i 1884. Som et resultat af denne farvning opdeles bakterier i to grupper:
- Gram (+) - bliver blå(stafylokokker og streptokokker).
- Gram (-) - farve pink til rød (enterobakterier, salmonella, E. coli).
Forskellige farvningsresultater skyldes forskellige farveegenskaber af bakterievægge. Gram-farvemetoden er stadig den vigtigste i diagnosticering af visse infektionssygdomme.
Andre farvningsteknikker
Lad os karakterisere nogle flere metoder, der er meget udbredt i bakteriologi.
- Ziehl-Nelson-metoden - bestemmer bakteriers syreresistens. Den identificerer de forårsagende stoffer til tuberkulose og mykobakterier.
- Romanovsky-Giemsa-teknik - farver acidofile (eddikesyre og mælkesyre) bakterier røde og basofile (spirocheter og protozoer) blå.
- Morozovs teknik - farver bakterier brune og gør deres flageller synlige.
Spore kan ses
Tsiels fuchcinfarvning giver dig mulighed for at se bakteriesporer. Med en lyserød farve efter farvning er de tydeligt synlige på baggrund af blå bakterier. Denne metode er også et bakteriologisk værktøj og er af stor praktisk betydning.
