Udtrykket "mikroskopi" har græske rødder. I oversættelse betyder det studiet af objekter ved hjælp af højpræcisionsinstrumenter. For nylig er fluorescens og elektronmikroskopi blevet mere og mere populært.
Opløsning
Under det forstår de som regel minimumsafstanden, hvori tydeligt skelnelige objekter kan findes. Graden af indtrængning i den mikroskopiske verden, evnen til at overveje størrelsen af det undersøgte element vil afhænge af udstyrets opløsning. Ved høj forstørrelse kan grænserne for objekter smelte sammen. Derfor er der visse grænser, ud over hvilke tilnærmelse af elementer er meningsløs.
Luminescensmikroskopimetode: mekanisme
Når den energi, der absorberes af et stof, omdannes til synlig stråling, opstår der en glød. Det kaldes luminescens. Dette fænomen skyldes, at nogle stoffer under påvirkning af lys begynder at udsende stråler med en anden (norm alt stor) bølgelængde. Dertil kommer nogle genstande, der under normal belysning har en visfarve, under påvirkning af ultraviolet ændre deres farve.
Specifics
En genstand, der ikke kan ses under ultraviolet lys, kan udsende en lys glans, hvis den behandles med et særligt stof. I den lyser elementerne i forskellige farver i mørket. Strålingens styrke er forskellig, men som regel er den lille. I denne henseende er fluorescensmikroskopi effektiv i et mørklagt rum. Når man bruger denne type undersøgelse, ses objektet i det lys, det selv udsender. Den kemiske sammensætning af væv, celler vil påvirke kvaliteten af undersøgelsen. Fluorescensmikroskopi anses til en vis grad for at være en histokemisk undersøgelse.
Klassificering
Fluorescensmikroskopi kan være primær eller sekundær. I sidstnævnte tilfælde behandles objektet med specielle forbindelser, der giver en glød. Primær fluorescerende mikroskopi er baseret på grundstoffets egen evne til at udsende lys.
Udstyr
Fluorescensmikroskopi udføres ved hjælp af en række forskellige enheder. Deres hovedelement er illuminatoren. Den er udstyret med en UV-lampe. Derudover bruger enhederne et sæt filtre. I nogle enheder er der en del forskellige konfigurationer. Afhængigt af hvilken farve der bruges til at excitere luminescens - ultraviolet eller blå, placeres et passende filter mellem lyskilden og objektet, der undersøges. Da gløden af et mikroskopisk element er energetisk svagere end det spændende lys, vil det kun blive fanget under én betingelse. Overskydende stråler fra kilden skal afskæres af et gulgrønt filter. Det er placeret på enhedens okular. Den mest udt alte effekt af luminescens vil være, når filteret fuldstændig afskærer strålerne, der kommer fra lyskilden.
Hvad består en synlig lysinstallation af? Den indeholder en skarp lyskilde og et biologisk mikroskop. Et blåviolet filter er placeret mellem enhedens spejl og lampen. Det kan være FS-1, UFS-3 og så videre. Det gule filter sættes på mikroskopets okular. Med deres hjælp falder blåviolet lys på objektet. Det ophidser luminescens. Men dette lys kan forstyrre at se gløden. Derfor bliver den på vej til øjet afskåret af et gult filter. Belysning indstilles efter Koehler-metoden, med én undtagelse. Kondensatormembranen skal være helt åben. Ved undersøgelse er det vigtigt at bruge en ikke-fluorescerende immersionsolie. For at reducere sin egen glød tilsættes nitrobenzen til den (2-10 dråber / 1 g).
Luminescensmikroskopi: anvendelser i mikrobiologi
Fordelene ved denne type undersøgelse er:
- Farvebilleder.
- Selvudsendende elementer med høj kontrast på en sort baggrund.
- Detektion og lokalisering af visse typer vira og mikrober.
- Evnen til at studere gennemsigtig og uigennemsigtiglevende organismer.
- Studie af livsprocesser i deres dynamik.
Det skal også siges, at luminescerende mikroskopi bidrager til udviklingen af de fineste metoder inden for histo- og cytokemi, ekspresdiagnostik.